إعـــــــلان

تقليص
لا يوجد إعلان حتى الآن.

سؤال بخصوص تقنية PCR

تقليص
X
 
  • تصفية - فلترة
  • الوقت
  • عرض
إلغاء تحديد الكل
مشاركات جديدة

  • سؤال بخصوص تقنية PCR

    السلام عليكم ورحمة الله وبركاته

    انا استعمل محلول ماستر مكس amplitaq gold pcr master mix 2Xويحتوي على كل شيئ باستثناء عينة الدي ان ايه والماء
    تركيز MgCl2 1.5mM سؤالي هو كيف استطيع ان أغير في تركيز ال ماجنيسيوم الكلورايد بحيث اني ابي ارفع التركيز الى 2 ونص علما بأن تركيز الماجنيسيوم كلوريد اللي راح استعمله للاضافة يبلغ 25mM حاولت اسوي الحسابات بس ماعرفت . علما بأني راح استعمل 2 ميكروليتر من الدي ان ايه + 1 ميكروليتر من primers forward+ 1 ميكروليتر من primer reverse والكمية الكلية في كل انبوب راح تكون 50 ميكروليتر

  • #2
    Hi my dear,

    Based on your question you want the final concentration of MgCl2 to be 2.5 mM in 50 µl final volume and you have 25mM MgCl2 stock .

    You need to add 2 µl from 25mM MgCl2 in your reaction + 2 µl DNA +2 µl primers + 44 µl master mix .

    I advise you to use the regular PCR buffer + MgCl2 instead of using pre mix master mix because if there is any contamination you can save your Taq + dNTPs and its quite cheaper than pre mix master mix.

    تعليق


    • #3
      5 ميكروليتر من تركيز 25 ملي مولار في 50 ميكروليتر حجم نهائي يعطي تركيز 2.5 ملي مولار من الماغنيسيوم.

      هناك نوعان من مكونات البي سي ار
      Mastermix
      و
      core kit

      أنا أتفق مع الاخت الواقع والحياد الكور كيت أفضل ويعطي flexibility كما هو الحال معك الآن لانك تريد تغيير الماغنيسيوم.

      تعليق


      • #4
        شكرا جزيلا على ردودكم وسأعمل بنصيحتكم

        تعليق


        • #5
          Calculations in molecular biology and biotechnology: a guide to mathematics ...
          By Frank Harold Stephenson


          book link click here

          تعليق

          يعمل...
          X