كيفية عمل مزارع الخلايا

[اخصائي وراثة بيوكيميائية]

مرحبا يا جماعة


راح اقدم لكم اليوم كتيب صغير عن كيفية عمل مزار الخلايا نحن استخدمناه كتير وكتير من المختبرات استخدمتو وهو بيوضح كل شي من طريقة التحضير وتركيز المواد وما عليك غير تتبع التعليمات ...نحن بمختبرات الوراثة بنلجا لعمل مزارع كريات بيضا وخزعات من العضلات وما الى ذلك يعني ...ارجو انو يفيدكم وخصوصا بشغلكم بداخل المعمل .....وتقبلو فائق احترامي



لاتنسونا بدعائكم


اخوكم مازن العثمان

[نبض المختبر]

موضوع جيد يااخ وربنا يوفقك دنيا واخره:sm188:

[Louis Pasteur]

جزاك الله خير.. زراعة الخلايا موضوع شيّق بالنسبة لي
:)

[الواقع والحياد]

يعطيك العافيه اخي الكريم شرح واضح و مبسط

سؤالي لو تكرمت :

what is the different between the media during culture and send out sample ??

what is the additinoal copmonent??

كذلك هلا أعطيتنا نبذه عن طريقه عمل lymphoblast cultrue ??


__________________________________________________ ___________

[elza3eem82]

Assalamu alaikom........
Thank you very much for this nice file about tissue culture and i hope u support us with more and more about it...but i have one question...i hope i can find an answer,which is..
Sometimes...U get a thin layer of elongated cells at the surface of the culture and there is no contamination...this is in case if u have bone marrow cells and another question....how can u choose selective markers for cultured bone marrow cells,any specific marker or there is a spicific limitations for the marker in choice...


Thanking your help



Elza3eem82

[M.S.O]

THANXXXXXXXXXXXX

[اخصائي وراثة بيوكيميائية]

السلام عليكم
انا اسف يا اختي الواقع والحياد اني طولت بالرد عليكي لاني كنت مسافر برة البلد .
بخصوص السؤال الاول فانا كنت اسوي cell culture من قبل سنتين والحين ماعدت اسويها لكن انشا الله اعطيكي الااجابة الوافية .
what is the different between the media during culture and send out sample

اولا الميديا اللي نستخدمها تجي مصنعة جاهزة من الشركة مضاف لها L-glutamine ونحن بدورنا نضيف عليها bovine serum albumin وكمان بنضيف penicillin-streptomycin .

اما الميديا اللي كنا نرسلها للخارج فكنا نجمدها بالنيتروجين السائل وفي فرق بسيط جدا بالميديا كنا نستخدم نفس الميديا اللي فوق ونضيف عليها 10% DMSO طبعا وظيفتو كالتالي
DMSO has been used as a cryoprotectant and is still used to preserve cell suspensions. Without it, up to 90 percent of frozen cells will become inactive. It is particularly important in the freezing and long-term storage of embryonic stem cells and hematopoietic stem cells, which are often frozen in a mixture of 10% DMSO and 90% fetal serum.

بالنسبة للسؤال الثاني
lymphoblast culture ؟؟؟؟؟
انا استخدمت طريقة معروفة كتير وهي
Lymphblastoid cell line
Epstein Barr Virus Transformation of Blymphocytes

وطريقتها باختصار على خطوتين:
1- grow Epstein barr virus
نجيب تيوبات خاصة فيها الفيروس ومعاه خلايا ونميها بي ميديا جاهزة ومعاها fetal bovine serum ونميها حوالي 3 ايام ناخذ خليط الخلايا والفيروسات المتكاثرة ونسوي ترسيب وناخذ supernatant وهو يكون محتوي على الفيروس .
2- transform B cells
ناخذ دم مجمع بانابيب فيها مانع التجلط الهيبارين ونخفف الدم بي saline buffer ونضيف ال ficoll-paque ونوي طرد مركزي وناخذ الطبقة البيضة اللي في النص المحتوية على اللمفوسيت ونحطها بي بيئة محتوية على ميديا وجلوتامين ونضيف ونحط عليهمsupernatant تبع الفيروس اللي حضرناه ونضيف cyclosporine ونعملها حضانة في .CO2 incubator

هذا باختصار شديد . وتقبلي فائق احترامي

[اخصائي وراثة بيوكيميائية]

بالنسبة لسؤالك يا زعيم فانا مو مختص بالسيتولوجي وعلم الانسجة والخلية ...بصراحة ما بقدر فيدك .....وشكرا على تعليقك .....

[nona]

مشكور اخصائي وراثة بيوكيميائية علي الموضوع الرائع

[سليمان العبسي]

جزاك الله الف خيييييييييييييييييييير

[waldmed]

جزاك الله خيرا يا أخي

[antivirus]

الله يعطيك الف عافية على مجهودك يا اخ مازن العثمان

[prof91]

جزاك الله خيرا هذا موضوع روعة

[mohamad]

hallo Mr
could you please sent to me the method of making cell cultures of the lines of bearst cacer after therapy with cis platine
and the method of digistive of RNA with a chemical or enzimic method

i am making my PhD in germany in toxikology and I need as these information

thanks in advance

[المهاجر@]

مشكوووووووووووووووور وجزاك الله ألف خير

[فني (مختبر)]

يعطيك العافيه