طريقة صبغة السوائل والمسحات صبغة البابانيكولاPapanicolaou (PAP) Stain
1. النواة تأخذ اللون الأزرق مع وضوح التفاصيل .
2. السيتوبلازم يأخذ اللون الأحمر في الخلايا الحامضية و يأخذ اللون الأزرق أو الأخضر المزرق في الخلايا القاعدية .
3. أما الخلايا أو رقائق الأنسجة التي تتخللها الدم فتأخذ اللون البرتقالي أو البرتقالي المخضر .
ملحوظة :
- حاليا يوجد جهاز Cyto Tek Strainer وهو جهاز صبغ اتوماتيك وتوضع به الصبغات ويقوم الجهاز بتمرير الشريحة اتوماتيك علي محاليل الصبغة حتى النهاية وتصبح الشريحة جاهزة للفحص .
كما يوجد بعض المواد التي توضع علي الشريحة بعد الصبغة للاحتفاظ بها لفترة طويلة .
1 - محاليل الصبغة
(هيماتوكسيليــــــــن Eosin-Aziure-50-Orange G6) يمكن تحضيرها من الكيماويات ويمكن شرائها جاهزة للعمل
الاختصارات الشائعة
تحضير المحاليل والكواشف المعملية
- توضع الشريحة المثبتة في كحول بتركيزات تنازلية 100% ثم 70 ثم 50% لمدة واحدة دقيقة في كل تركيز .
- تغسل الشريحة في ماء مقطر.
- تصبغ بصبغة هيماتوكسيلين لمدة 4 دقائق
- تغسل بماء جاري لمدة 2 دقيقة
- تغمر في كحول حمضي لمدة ثانية
- تغسل بماء جاري لمدة 15 دقيقة
- كحول 70% لمدة 2 دقيقة
- كحول 95% لمدة 2 دقيقة
- تصبغ بصبغة Orange G6 لمدة 2 دقيقة
- تغسل بالكحول 95 % لمدة 2 ثانية
- تصبغ في Eosine Azin لمدة 2 دقيقة
- توضع في كحول 95 % لمدة ثواني
- كحول 100% لمدة 1 ق
- كحول 100 % لمدة 1 ق
- زيلول لمدة 5 ق
- زيلول لمدة 5 ق
ثم توضع نقطة من كندا بلسم علي الشريحة ويوضع عليها غطاء.
1. النواة تأخذ اللون الأزرق مع وضوح التفاصيل .
2. السيتوبلازم يأخذ اللون الأحمر في الخلايا الحامضية و يأخذ اللون الأزرق أو الأخضر المزرق في الخلايا القاعدية .
3. أما الخلايا أو رقائق الأنسجة التي تتخللها الدم فتأخذ اللون البرتقالي أو البرتقالي المخضر .
ملحوظة :
- حاليا يوجد جهاز Cyto Tek Strainer وهو جهاز صبغ اتوماتيك وتوضع به الصبغات ويقوم الجهاز بتمرير الشريحة اتوماتيك علي محاليل الصبغة حتى النهاية وتصبح الشريحة جاهزة للفحص .
كما يوجد بعض المواد التي توضع علي الشريحة بعد الصبغة للاحتفاظ بها لفترة طويلة .
1 - محاليل الصبغة
(هيماتوكسيليــــــــن Eosin-Aziure-50-Orange G6) يمكن تحضيرها من الكيماويات ويمكن شرائها جاهزة للعمل
الاختصارات الشائعة
الرمز
اللفظ الحرفي
الرمز
اللفظ الحرفي
DI
ديسيلتر (100 مل)
T
أنبوبة الاختبار (test)
Mg/dI
ملليجرام في كل 100 مل دم
S
أنبوبة المحلول القياسي standard
مل (mI)
ميلليتر/100 من الليتر
B
أنبوبة البلانك Blank
UI
ميكروليتر 1/1000 من مل
ع(N)
عياري Normal Solution
Iu
وحدة دولية International Unit
Mol/I
مولاري
R
الكاشف Reagent
RT
درجة حرارة الغرفة
C.B.C
صورة كاملة للدم
W.B.Cs
خلايا الدم البيضاء
R.B.Cs
خلايا الدم الحمراء
Plat.
صفائح دموية
Hb
هيموجلوبين
HCT
هيماتوكريت
CT
زمن التجلط
BT
زمن النزف
اللفظ الحرفي
الرمز
اللفظ الحرفي
DI
ديسيلتر (100 مل)
T
أنبوبة الاختبار (test)
Mg/dI
ملليجرام في كل 100 مل دم
S
أنبوبة المحلول القياسي standard
مل (mI)
ميلليتر/100 من الليتر
B
أنبوبة البلانك Blank
UI
ميكروليتر 1/1000 من مل
ع(N)
عياري Normal Solution
Iu
وحدة دولية International Unit
Mol/I
مولاري
R
الكاشف Reagent
RT
درجة حرارة الغرفة
C.B.C
صورة كاملة للدم
W.B.Cs
خلايا الدم البيضاء
R.B.Cs
خلايا الدم الحمراء
Plat.
صفائح دموية
Hb
هيموجلوبين
HCT
هيماتوكريت
CT
زمن التجلط
BT
زمن النزف
تحضير المحاليل والكواشف المعملية
اسم الكاشف أو المحلول
طريقة التحضير
مجال استخدامها
EDTA, Dipotassium or Disodium Salt
100 جم تذاب في ماء مقطر حتي 1 لتر وتوزع بأحجام مناسبة في أنابيب صغيرة بحيث تعطي تركيز 1.5 + 0.25 مجم/ مل دم – توضع في حضان أو فرن تجفيف عند درجة 20 ْ م ( يمكن استخدام المسحوق بنفس التركيز
مانع التجلط المفضل لعمل صورة الدم
محلول سهلي
تحضير حمض هيدروكلوريك المخفف( 10/1 عياري) 8.6 / لتر ماء مقطر.
لتقدير نسبة الهيموجلوبين بطريقة سهلي
محلول درا بكن
سيانيد بوتاسيوم 50 مجم.
فريسيانيد بوتاسيوم 200 مجم.
ثنائي فوسفات البوتاسيوم: 140 مجم
ماء مقطر: حتى 1 لتر
لتقدير نسبة الهيموجلوبين بطريقة درا بكن
محلول عد كريات الدم الحمراء
كلوريد الصوديوم 0.6 جم
سترات الصوديوم 1 جم
فورمالين 1 مل
ماء مقطر حتى 100 مل.
لعد كريات الدم الحمراء
طريقة التحضير
مجال استخدامها
EDTA, Dipotassium or Disodium Salt
100 جم تذاب في ماء مقطر حتي 1 لتر وتوزع بأحجام مناسبة في أنابيب صغيرة بحيث تعطي تركيز 1.5 + 0.25 مجم/ مل دم – توضع في حضان أو فرن تجفيف عند درجة 20 ْ م ( يمكن استخدام المسحوق بنفس التركيز
مانع التجلط المفضل لعمل صورة الدم
محلول سهلي
تحضير حمض هيدروكلوريك المخفف( 10/1 عياري) 8.6 / لتر ماء مقطر.
لتقدير نسبة الهيموجلوبين بطريقة سهلي
محلول درا بكن
سيانيد بوتاسيوم 50 مجم.
فريسيانيد بوتاسيوم 200 مجم.
ثنائي فوسفات البوتاسيوم: 140 مجم
ماء مقطر: حتى 1 لتر
لتقدير نسبة الهيموجلوبين بطريقة درا بكن
محلول عد كريات الدم الحمراء
كلوريد الصوديوم 0.6 جم
سترات الصوديوم 1 جم
فورمالين 1 مل
ماء مقطر حتى 100 مل.
لعد كريات الدم الحمراء
اسم الكاشف أو المحلول
طريقة التحضير
مجال استخدامها
محلول عد كريات الدم البيضاء الكلي
1 % محلول جنشياتا البنفسجية 1 مل حامض خليك ثلجي
(Glacial Acetic Acid) 1.5 مل
ماء مقطر حتى 100 مل
لعد كريات الدم البيضاء الكلي
صبغة ليشمان
يذاب 1.5 جرام مسحوق صبغة ليشمان في 1 لتر كحول ايثيلي كآلاتي:
يوضع 1.5 جم من الصبغة في هاون وتسحق مع إضافة قليل من الكحول مع استمرار السحق واستمرار إضافة الكحول تدريجيا حتى الذوبان الكامل .
ترشح ويفضل عدم استخدام الصبغة ألا بعد أسبوع من تحضيرها
لعد كريات الدم البيضاء النوعي
محلول سترات الصوديوم
تحضير 3.8 جم سترات الصوديوم / 100 مل ماء مقطر
لعمل سرعة الترسيب
محلول بندكت
17.3 جم كبريتات نحاس تذاب في 100 سم 3 ماء مقطر
173 جم سترات صوديوم ثلاثية + 100 جم كربونات صوديوم يبا في 800 سم3 ماء مقطر أضف محلول كبريتات النحاس إلي المحلول الآخر .ببط مع التقليب المستمر ، أكمل المحلول إلي لتر بالماء المقطر .
للكشف عن السكر في البول
طريقة التحضير
مجال استخدامها
محلول عد كريات الدم البيضاء الكلي
1 % محلول جنشياتا البنفسجية 1 مل حامض خليك ثلجي
(Glacial Acetic Acid) 1.5 مل
ماء مقطر حتى 100 مل
لعد كريات الدم البيضاء الكلي
صبغة ليشمان
يذاب 1.5 جرام مسحوق صبغة ليشمان في 1 لتر كحول ايثيلي كآلاتي:
يوضع 1.5 جم من الصبغة في هاون وتسحق مع إضافة قليل من الكحول مع استمرار السحق واستمرار إضافة الكحول تدريجيا حتى الذوبان الكامل .
ترشح ويفضل عدم استخدام الصبغة ألا بعد أسبوع من تحضيرها
لعد كريات الدم البيضاء النوعي
محلول سترات الصوديوم
تحضير 3.8 جم سترات الصوديوم / 100 مل ماء مقطر
لعمل سرعة الترسيب
محلول بندكت
17.3 جم كبريتات نحاس تذاب في 100 سم 3 ماء مقطر
173 جم سترات صوديوم ثلاثية + 100 جم كربونات صوديوم يبا في 800 سم3 ماء مقطر أضف محلول كبريتات النحاس إلي المحلول الآخر .ببط مع التقليب المستمر ، أكمل المحلول إلي لتر بالماء المقطر .
للكشف عن السكر في البول
اسم الكاشف أو المحلول
طريقة التحضير
مجال استخدامها
محلول اليود المائي( سريع التحلل ، ولذلك يحضره مرة من كل ثلاثة أسابيع)
2 جم يود يد البوتاسيوم تذاب في 100 سم3 مقطر ثم يضاف 1 جم يود معدني.
يحفظ في زجاجات بنية اللون.
للكشف عن الطفيليات ذات الخلية الواحدة
حمض خليك مخفف
3سم3 حمض خليك مركز ( جليشيال) 97سم 3 ماء مقطر
للكشف عن الزلال في البول
محلول النوشادر القوي
يرد في عبوات جاهزة
للكشف عن الأستون في البول
مسحوق نتروبروسيد الصوديوم
يرد في عبوات جاهزة
للكشف عن الأستون في البول
مسحوق زهر الكبريت
يرد في عبوات جاهزة
للكشف عن أملاح الصفراء في البول
الفوشية
إذابة 25 جم حمض ثلاثي كلوريد الخليك ، 50 مل ماء مقطر ويضاف 10 مل من محلول كلوريد الحديد بتركيز 10 % ويكمل إلي 100 مل ماء مقطر
للكشف عن البيلوروبين في البول بعد ترسيبه بكلور يد الباريوم .
ملاكيت جرين
3% ( المحلول المركز)
يذاب 3 جم ملاكيت جرين في 100 مل ماء مقطر تحفظ في زجاجة ملونة كمخزون .
ملاكيت جرين المخفف
يؤخذ 1 مل من المحلول المركز السابق + 100 مل جليسرين + 100 مل ماء مقطر
السيلوفان المشبع
يقطع السيلوفان مقاس 22X 30 مم ويوضع في محلول الصبغة المخفف قبل الاستعمال ب 24 ساعة علي الأقل حتى يتم تشبع السيلوفان بالصبغة .
طريقة التحضير
مجال استخدامها
محلول اليود المائي( سريع التحلل ، ولذلك يحضره مرة من كل ثلاثة أسابيع)
2 جم يود يد البوتاسيوم تذاب في 100 سم3 مقطر ثم يضاف 1 جم يود معدني.
يحفظ في زجاجات بنية اللون.
للكشف عن الطفيليات ذات الخلية الواحدة
حمض خليك مخفف
3سم3 حمض خليك مركز ( جليشيال) 97سم 3 ماء مقطر
للكشف عن الزلال في البول
محلول النوشادر القوي
يرد في عبوات جاهزة
للكشف عن الأستون في البول
مسحوق نتروبروسيد الصوديوم
يرد في عبوات جاهزة
للكشف عن الأستون في البول
مسحوق زهر الكبريت
يرد في عبوات جاهزة
للكشف عن أملاح الصفراء في البول
الفوشية
إذابة 25 جم حمض ثلاثي كلوريد الخليك ، 50 مل ماء مقطر ويضاف 10 مل من محلول كلوريد الحديد بتركيز 10 % ويكمل إلي 100 مل ماء مقطر
للكشف عن البيلوروبين في البول بعد ترسيبه بكلور يد الباريوم .
ملاكيت جرين
3% ( المحلول المركز)
يذاب 3 جم ملاكيت جرين في 100 مل ماء مقطر تحفظ في زجاجة ملونة كمخزون .
ملاكيت جرين المخفف
يؤخذ 1 مل من المحلول المركز السابق + 100 مل جليسرين + 100 مل ماء مقطر
السيلوفان المشبع
يقطع السيلوفان مقاس 22X 30 مم ويوضع في محلول الصبغة المخفف قبل الاستعمال ب 24 ساعة علي الأقل حتى يتم تشبع السيلوفان بالصبغة .
تعليق