إعـــــــلان

تقليص
لا يوجد إعلان حتى الآن.

RIBA" Recombinant Immune Blotting Assay

تقليص
X
 
  • تصفية - فلترة
  • الوقت
  • عرض
إلغاء تحديد الكل
مشاركات جديدة

  • RIBA" Recombinant Immune Blotting Assay

    •تقنية التنقيط المناعي التأكيدي للأجسام المضادة للفيروس الكبدي" سي"

    " RIBA" Recombinant Immune Blotting Assay

    يجرى هذا التحليل للتأكد من ايجابية الأجسام المضادة وهي تقنية مشابهة تماما لتقنية المقايسة المناعية الانزيمية ولكنها تتميز عنها بالحساسية الفائقة والتخصصية العالية حيث يتم تخفيف العينة بمقدار 1/100 ثم تستخدم مستضدات محضرة بالهندسة الوراثية و مستخلصه من الأنواع الوراثية المختلفة للفيروس تم تثبيتها على شرائط من النيتروسيليلوز وبعد ذلك يستخدم المتلازم الانزيمي مع وسيطه للحصول على النتائج والتي تظهرعلى هيئة الوان بنفسجية على شرائط النيتروسيليلوز (شكل رقم -11). يستخدم لإجراء هذا الإختبار الكاشــفHCV Score)) من شـــــــــركة (*™ INNO-LIA), ويختبر الكاشف 18عينة فقط .
    نوع العينات المستخدمة:
    يستخدم لإجراء هذا الإختبار عينات مصل الدم.


    محتويات الكاشف:
    1)منصة بلاستيكية تثبت عليها قنوات طولية مجوفة بطريقة تسمح لشرائط النيتروسليولوز بالإنغمار بها.
    2)كونترول ايجابي وكونترول سلبي للفيروس الكبدي سي.
    3)20 شريط نيتروسيليولوزي محفوظة في أنبوبة بلاستيكية.
    4)لاصقات شفافة مانعة للتسرب.
    5)مخفف العينات (Sample Diluent).
    6)محلول الغسيل Washing Solution) ).
    7)عبوة محلول المتلازم الإنزيمي (Conjugate) جاهز للإستخدام.
    8)عبوة الـكاشف اللوني للرابط الإنزيميSubstrate) ) جاهز للإستخدام.
    9)محلول ايقاف التفاعل حمض الكبريتيك (H2SO4 ).
    10)بطاقة قرائة النتائج المحتوية على العلامات الإيجابية للمناطق المختلفة من جينوم الفيروسReading Card)).
    11)ورقة العمل (Woorking Sheets ).
    خطوات اجراء الإختبار:
    1.تسجل الكونترولات وأرقام العينات حسب الترتيب التسلسلي للعينات على ورقة العمل الخاصه بالاختبار.
    2.يجب التأكد أولا" من صلاحية الكاشف ومحتوياتة وذلك للمحافظة على العينات من الاهدار.
    3.يتم ترقيم القنوات المجوفه والمثبتة على الطبق البلاستيكي بالقلم الرصاص.
    4.يضاف 1 مل من مخفف العينات ((Sample Diluent في كل خانة من خانات الطبق.
    5.يضاف 10μ من كل عينة في المكان المخصص لها في قنوات الطبق وتوضع نفس الكمية من الكونترولات في القناتين الأخيرة من الطبق.
    6.يوضع في كل خانة من الطبق شريط اختبار يحمل نفس رقم العينة مع مراعاة استخدام الملقط في حمل الأشرطة وان تكون الاشرطة مغمورة تماما في محلول التخفيف.
    7.يغطى الطبق بلاصق شفاف مانع للتسرب مرفق مع الكاشف ثم يحضن الطبق بوضعة على هزازالأطباق ((Plateform من شركة ((Vari Mix طوال الليل ( 16ساعة ±2) في درجة حرارة الغرفة (18˚- 25˚ ) م.
    8.يزال اللاصق من على الطبق بعناية فائقة منعا لتلوث الاشرطة ثم يتم التخلص من المحلول المخفف باستخدام الماصات البلاستيكية المعقمة ذات الاستخدام الواحد ويتم غسل الأشرطة باستخدام محلول الغسيل المرفق مع الكاشف (Washing Solution) و المحضرحسب عدد العينات باضافة 1 مل منه الى كل خانة 3 مرات لمدة 5 دقائق.
    9.يضاف ا مل من محلول المتلازم الانزيمي (Conjugate) الى كل خانة باحتراس ويغطى الطبق باللاصق الشفاف ثم يوضع على الهزاز(Vortex) لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (18˚-25˚ ) م.
    10.يتم التخلص من المتلازم الانزيمي باستخدام الماصات البلاستيكية المعقمة ذات الاستخدام الواحد وتغسل الأشرطة باستخدام محلول الغسيل(Washing Solution) باضافة 1مل منه الى كل خانة 3 مرات لمدة 5 دقائق.
    11.يضاف 1مل من محلول الكاشف اللوني للرابط الانزيمي(substrate) الى كل خانة من خانات الطبق ويغطى الطبق باللاصق الشفاف ويوضع على الهزاز(Vortex) لمدة30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (18˚-25˚ ) م حتى تظهر الخطوط البنفسجية على الشريط ثم يتم التخلص من المتلازم الانزيمي باستخدام الماصات البلاستيكية المعقمة ذات الاستخدام الواحد .
    12.يضاف 1مل من محلول الايقاف (H2SO4 ) لكل خانات الطبق دون تغطيته ثم يوضع على الهزاز(Vortex) لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة
    (18˚-25˚ ) م.
    13.يرفع الطبق من الهزاز ويتم التخلص من محلول الايقاف باستخدام الماصات البلاستيكية المعقمة ذات الاستخدام الواحد .
    14.ترفع الأشرطة باستخدام الملقط وتوضع على ورق نشاف أو توضع في حضان جاف درجة حرارتة 37˚م لمدة 30 دقيقة لتسهيل عملية التجفيف.
    15.تثبت الأشرطة على ورقة العمل المرفقة مع الكاشف ثم تقرأ النتائج بواسطة بطاقة القراءة المرفقه بالكاشف.
يعمل...
X