ماهي الصبغات المستخدمه في قسم الاحياء الدقيقه؟ وطريقة كل صبغه
إعـــــــلان
تقليص
لا يوجد إعلان حتى الآن.
... الصبغات عاجل...
تقليص
X
-
صبغه جرام ..
تصبغ للبكتيريا ..
1_شريحه نظيفه تحط عليها ماء مقطر ة وتاخذ باللوب من المستعمر((عمرها 24 ساعه)) اللى تبي تعرفها وتفردها زين على شريحه وبعدها تنشفها بالهب طبعا من بعيد <<مرحله تثبيت االغشاء ..
2_الصبغ..
نقاط من صبغه كريستال بنفسجي لمده دقيقه + تغسل بالماء المقطر+ نقاط من اليود لمده دقيقه +تغسل بالماء+ نقاط من كحول ايثيلي لمده دقيقه + تغسل بالماء المقطر + نقاط من صبغه صفرانين لمده دقيقه +تغسل بالماء المقطر
تنشفها برضو بالهب من بعيد
تحط في غطاء الشريحه زيت السيدر وتحطها بالمقلوب على الشريحه بحيث الزيت يلصق بالبكتيريا
المشاهده
اما بكتيريا لونها موفي ((بنفسجي))<<تسمي موجبه لجرام
مثل بكتيريا staph aureus
او تكون حمراء<<سالبه لجرام
مثل بكتيريا E.coil
-
صبغ الجراثيم البكتيرية Spore Staining
- الجراثيم الداخلية Endospores مقاومة بطبيعتها لتقبل الأصباغ, لذا لايمكن صبغها بالطرق العادية للصبغ
- هناك عدة طرق لصبغ الجراثيم منها طريقة شافر وفولتون Shaeffer & Fulton
طريقة العمل:
1-يحضر غشاء بكتيري من مزرعة بكتيرية عمرها 48 ساعة ثم يثبت الغشاء
2-يغمر الغشاء بضبغة أخضر الملاكيت وتسخن الشريحة بتعريض سطحها السفلي للهواء الساخن فوق اللهب لمدة من 4-5 دقائق مع مراعاة عدم غليان الصبغة وعدم جفافها
3-بعد ان تبرد الشريحة تغسل تحت تيار ماء خفيف
4-يصبغ الغشاء بصبغة الصفرانين لمدة دقيقة
5-يغسل الغشاء تحت تيار ماء خفيف
6-تترك الشريحة لتجف
7-يفحص التحضير تحت المجهر باستعمال قوة 10 ثم العدسة الزيتية (قوة 100) وزيت السيدر
8-لاحظ ظهور الجراثيم الداخلية خضراء اللون في حين أن الخلايا الخضرية المتصلة بالجرثومة تكون حمراء اللون.
تعليق
-
صبغ الغلاف Staining of Capsule
- الغلاف هو منطقة هلامية تحيط بالجدار الخلوي من الخارج , ويطلق عليه الغلاف أو الطبقة الخارجية Outer layer أو الطبقة الهلامية Slime layer
- يتخلف سمك الغلاف في البكتيريا المغلفة Encapsulated وقد لايوجد الغلاف اصلا في البكتيريا الغير مغلفة Nonencapsulated
- تتركب مادة الغلاف في معظم الحالات من عديدات التسكر Polysaccharides
- يصعب صبغ الغلاف بالطرق العادية
طريقة العمل:
1-يحضر غشاء بكتيري لمزرعة حديثة العمر ويترك الغشاء ليجف في الهواء(لاتستخدم الحرارة)
2-يصبغ الغشاء بمحلول مائي لصبغة الكريستال البنفسجي لمدة 2 دقيقة
3-يغسل الغشاء بمحلول كبريتات النحاس 20% ( لايستخدم الماء)
4-تترك الشريحة لتجف في الهواء تماما
5-يفحص الغشاء تحت المجهر
6- ( سوف تظهر الخلايا بلون أزرق غامق بينما تظهر طبقة الغلاف كهالة زرقاء باهتة)
تعليق
-
فحص حركة البكتيريا Motility of Bacteria
-بعض البكتيريا تتحرك حركة حيوية حقيقية Vital movement في حين أن البعض الآخر لا يتحرك
-الحركة الحيوية تعزى لوجود الأسواط Flagella
-يمكن دراسة حركة البكتيريا بالفحص المجهري لخلايا البكتيريا الحية غير المصبوغة بواسطة طريقة النقطة المعلقة Hanging Drop Method
-يجب التمييز بين الحركة الحقيقية التقدمية وبين الحركة البراونيةBrownian movement
-
طريقة العمل:
1-ينقل بابرة التلقيح ذات العقدة نقطة صغيرة من المزرعة البكتيرية حديثة العمر نشطة النمو الى مركز غطاء شريحة نظيف
2-يوضع في اركان الغطاء نقط صغيرة من الفازلين
3-توضع الشريحة المقعرة فوق الغطاء ثم تقلب الشريحة باحتراس بحيث تكون النقطة المعلقة في منتصف التقعير بدون ملامسة قاع الشريحة
4-توضع الشريحة على المجهر ويتم الفحص عند حافة القطرة مع مراعاة تقليل الاضاءة
اتمني اكون افدتك..
تعليق
-
بسم الله الرحمن الرحيم
صبغه الاسيد فاست الخاصه ببكتريا التدرن
وطرقتها معروفه باخذ مسحه من البلغم بعد مزجه جيدا ومن ثم ترك المسحه تجف بامرارها فوق لهب خفيف
وتغطيتها بالسترونك كاربول فوكسين وامرارها فوق لهيب بحيث يبدأ الكاربول بالتبخر دون الغليان ومن ثم غسلها بالماء الجاري وتغطيتها بحامض الفسفوريك لازاله الصبغه الزائده لمده 30 ثانيه وغسلها بالماء الجاري وبعدها تغطيتها بالكاونتر ستين ( المثيلين بلو )) او غيرها وبعدا غسلها بالماء الجاري وتركه تجف وفحصها تحت العدسه الزيتيه حيث تظهر عصيات التدرن حمراء اللون
مع تقديري
تعليق
-
تعليق