http://www.arabslab.com/vb/showthrea...rect+comb+test

مشكور اخي عوني يوسف

I thank you from the depths of my heart I wish you luck

يعرف أيضاً باسم antiglobuline test أو AGT يشير إلى اختبارين دمويين سريريين في علم المناعة Immunology والدمويات المناعية Immunohematology. وهما اختبار كومبس المباشر Direct Coombs test واختبار كومبس اللامباشر Indirect Coombs test.
إذاً لا بد في البداية من مقدمة بسيطة في علم المناعة ..
ماهي المناعة؟؟
المناعة هي دفاع العضوية ضد العوامل الغريبة من جراثيم أو كائنات حية دقيقة..
للمناعة نوعان:
الأول: مناعة طبيعية لانوعية: الغاية منها منع دخول العوامل الغريبة وتكاثرها في العضوية والحد من انتشارها وتقسم إلى:
أ- خارجية: الجلد، الأغشية المخاطية، الزمرة الجرثومية الطبيعية، المثبطات ((ماهي المثبطات؟؟)).
ب- داخلية: عناصر الدم ((ماهي عناصر الدم التي تلعب دوراً في المناعة؟؟ وما دور كل منها؟؟))، الجملة الشبكية البطانية ((مم تتألف ؟؟)).
الثاني: مناعة مكتسبة نوعية : تظهر بعد التماس المباشر بين الخلايا المؤهلة مناعياً وبين العامل الغريب أو بقاياه .. وهناك طريقتان في ظهور المناعة المكتسبة النوعية:
أ- المناعة المتواسطة بالخلايا حيث تتعرف بعض اللمفاويات على العامل الممرض وتصبح متحسسة له بحيث تستطيع قتله بذاتها أو تحرض البالعات الصغيرة والكبيرة على عمل ذلك.
ب- المناعة الخلطية حيث تتعرف بعض اللمفاويات على مكونات العامل الممرض التي تسمى مستضدات antigens وترد عليها باصطناع أضداد خاصة ونوعية لهذه المستضدات تطلقها في الدم وأخلاط البدن ..وتكون هذه الأضداد على خمسة أنواع أصغرها IgG و أكبرها IgM((ماهي الأنواع الثلاثة الباقية؟؟))
إذا أحد أنواع المناعة هو إنتاج أضداد تجول في الدم ((في المصل أو مرتبطة على سطح الكريات الحمر)) وأخلاط البدن وهنا تكمن فائدة اختبار كومبس.
مبدأ اختبار كومبس:
الأضداد التي نبحث عنها سواء المرتبطة على سطح الكريات الحمر أو الجوالة في المصل تكون من نمط IgG وهي أضداد صغيرة غير قادرة على ربط الكريات الحمر ببعضها وبالتالي لا يحدث تراص بواسطتها فقط لذلك للكشف عن وجود هذه الأضداد يجب إضافة جزيئات أكبر ترتبط بها وتصل الكريات الحمر ببعضها وبالتالي يحدث التراص كما في الصورة:
اختبار كومبس المباشر Direct Coombs test: كريات دم على سطحها أضداد IgG + مصل كومبس الحاوي على أضداد IgM --> تراص.
اختبار كومبس اللامباشر Indirect Coombs test: مصل دم حاوي على أضداد IgG + كريات دم --> تحسيس للكريات الحمر (أي ارتباط الأضداد بسطح الكريات)ثم نضيف مصل كومبس الحاوي على أضداد IgM --> تراص.
اختبار كومبس المباشر Direct Coombs test:
يستخدم اختبار كومبس المباشر لتحري (كشف) هذه الأضداد أو بروتينات المتممة المرتبطة على سطح الكريات الحمر.
طريقة العمل:
تؤخذ عينة الدم وتغسل الكريات الحمر (لإزالة بروتينات البلازما) ثم تحضن مع أضداد للغلوبولين البشري (ويسمى كاشف كومبس Coombs reagent). إذا سبب هذا تراصاً للكريات الحمر يكون اختبار كومبس إيجابياً، وهذا يدل على أن الأضداد مرتبطة بسطح الكريات الحمر.
متى نجري اختبار كومبس المباشر؟؟
عندما نشك بوجود فقر دم انحلالي متواسط مناعياً (( تحطيم الكريات الحمر بتواسط الأضداد )). اختبار كومبس المباشر الإيجابي يدل على وجود آلية مناعية أصابت الكريات الحمر.
أي يتم في هذه الحالات إنتاج أضداد تلتصق على سطح الكريات الحمر مؤدية إلى انحلالها وحدوث فقر دم انحلالي.
قد تكون انحلال الدم وفق آلية:
1- مناعية ذاتية autoimmunity: مثل الذئبة الحمامية الجهازية.
2- خيفية alloimmunity ((ماذا نعني بالمناعة الخيفية؟؟)): مثل أمراض انحلال الدم عند حديثي الولادة ((نتيجة اختلاف الزمر الدموية بين الأم والطفل سواء على أساس عامل ريزوس أو ABO)) ، انحلال بسبب نقل الدم.
3- مسببة بالأدوية drug-induced immune-mediated mechanism: مثل البنسلين ، الكوينيدين.
اختبار كومبس اللامباشر Indirect Coombs test:
يستخدم اختبار كومبس اللامباشر لتحري (كشف) وجود تركيز قليل من أضداد الكريات الحمر الجوالة في المصل وغير المرتبطة بسطح الكريات الحمر وذلك قبل إجراء نقل الدم أو قبل الولادة عند الحامل.
طريقة العمل:
يقتطف المصل من الدم ويحضن المصل مع كريات حمر مغسولة فترتبط الأضداد في حال وجودها على سطح الكريات الحمر ((تحسيس للكريات)) نغسل الكريات الحمر المحسسة ثلاث أو أربع مرات ثم نضيف كاشف كومبس ((المذكور سابقاً)) فيحدث التراص.

لاجراء اختبار كومبس المباشر لابد من الحصول علي دم المريض في انبوبة تحوي مادة مانعة للتجلط مثل EDTA
تغسل كريات الدم الحمراء للمريض بواسطة NORMAL SALIN ثلاث مرات وفي كل مرة يتم التخلص من الطافي لتبقي الكريات الحمراء المترسبة
يؤخذ من الراسب بعد رج الانبوبة جيدا حوالي 1 ملي ويضاف له 3 قطرات من كاشف كومبس ANTI HUMEN GLUBIULIN
يجري طرد مركزي لمدة 20ثانية ثم تحضن الانبوبة في درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 10 دقائق وتقرأ بعد ذلك من خلال وجود التراص او عدمه