إن عدد الدورات يختلف بحسب نوعية الجهاز - والشركة المستخدمة ونوعية الحمض النووي المراد الكشف عنه
بالاضافة إلى الحجم النهائي للعينة
وغالبية الشركات والأجهزة تكون فيها عدد الدورات بين 35 - 50 دورة لمرحلة التضخيم الأخيرة بأقسامها.
وهذا مثال عن برمجة كيت HCV PCR RNA لنفس الشركة ولكن على ثلاث أجهزة:
[LEFT]Programming of RotorGene™ 3000/6000 (Corbett Reasearch)
¾ Reaction Volume (μl ): 50
¾ Temperature Profile:
Hold: 50°C – 30 min
Denature: 95°C – 15 min
Cycling – 95°C – 20 sec
60°C – 40 sec
Cycle Repeats – 42 times
Fluorescence is measured at 60°C on FAM (Green) and JOE (Yellow) channels
Programming of iQ iCycler™ and iQ5™ (Biorad)
Make sure that the iQ5 instrument is calibrated for working with 50 μl reaction mix. Perform the calibration with the
same tubes in which the amplification will be carried out.
Make sure that the following settings for dynamicwf are selected:
1 cycle 95 °С – 30 s
1 cycle 95 °С – 30 s*
*fluorescence measurement on the second step
1. Select in the main menu “Define Protocols” and click “Create a new protocol”. Set the following parameters:
Set Point - Dwell Time - Step - Repeats - Cycle
اشكرك
كيب لو جاني سؤال
او سألني احد كيف تحسبي عدد الدورات اشرح له مثل اجابتك
او كيف
بس مره اخذنا طريقه ع السريع كانت شفويه من الدكتور
كان ذكر رقم كتب لو حبيت احسب عدد دورات البي سي ار
لرقم 9
نقول 9^4
تعليق