تويت
السلام عليكم
وددت مشاركتكم لي في حل هذه المشكلة التي أتعبتني ولم أعرف لها سبب وهي
قمت بتضخيم منطقة معينة من شريط dna بواسطة pcr وأعطتني النتيجة التي أريد ولكن عندما أعدت التفاعل مرة أخرى لم تظهر لي نتيجة وأعدتها كثير ولكن ((تحلف ما تبغى تعطي نتيجة مثل المرة الأولى))
وإشتريت primer جديد نفس الذي استخدمته المرة الأولى و عملت له gradiant لنفس العينة ولكن أعطاني باند خفيفة جدا في نفس المكان مع ظهور باند أخرى ,,,
وهناك عدة أسئلة تحيرني جدا:
ما سبب ظهور الباند الثانية مع الصبغة كما في الصورة؟علما بأني أستخدم فلتر tips يعني متأكد مافي تلوث عندي
الصورة الأولى هي gradiant المرة الأولى
الصورة الثاني هي gradiant المرة الثانية
برنامج التفاعل كا لتالي:
Gradient Program
BLOCK CNTRL
LID=105°
AUTO NOWAIT
0:05:00 T= 96.0° 1
0:00:35 T= 96.0° 2
0:00:35 T= 63.0° 3
+0:00 + 0.0
+0:0°/s R= 3.0°/s
G= 5.0°
00:00:45 T= 72.0° 4
REP 40 GOTO 2 5
00:04:00 T= 72.0 ° 6
ENTER Hold 4.0° 7
end
OPTIONS Show Gradient
Settings: Tube: 0.2 ml T=60.0C G= 7.0C
Pos. 1: 58C Pos. 5: 60.8C Pos. 9: 66.1C
Pos. 2: 58.2C Pos. 6: 62.1C Pos:10: 67.2C
Pos. 3: 58.7C Pos. 7: 63.5C Pos.11: 68C
Pos. 4: 59.6C Pos. 8: 64.9C Pos.12: 68.5C
وددت مشاركتكم لي في حل هذه المشكلة التي أتعبتني ولم أعرف لها سبب وهي
قمت بتضخيم منطقة معينة من شريط dna بواسطة pcr وأعطتني النتيجة التي أريد ولكن عندما أعدت التفاعل مرة أخرى لم تظهر لي نتيجة وأعدتها كثير ولكن ((تحلف ما تبغى تعطي نتيجة مثل المرة الأولى))
وإشتريت primer جديد نفس الذي استخدمته المرة الأولى و عملت له gradiant لنفس العينة ولكن أعطاني باند خفيفة جدا في نفس المكان مع ظهور باند أخرى ,,,
وهناك عدة أسئلة تحيرني جدا:
ما سبب ظهور الباند الثانية مع الصبغة كما في الصورة؟علما بأني أستخدم فلتر tips يعني متأكد مافي تلوث عندي
الصورة الأولى هي gradiant المرة الأولى
الصورة الثاني هي gradiant المرة الثانية
برنامج التفاعل كا لتالي:
Gradient Program
BLOCK CNTRL
LID=105°
AUTO NOWAIT
0:05:00 T= 96.0° 1
0:00:35 T= 96.0° 2
0:00:35 T= 63.0° 3
+0:00 + 0.0
+0:0°/s R= 3.0°/s
G= 5.0°
00:00:45 T= 72.0° 4
REP 40 GOTO 2 5
00:04:00 T= 72.0 ° 6
ENTER Hold 4.0° 7
end
OPTIONS Show Gradient
Settings: Tube: 0.2 ml T=60.0C G= 7.0C
Pos. 1: 58C Pos. 5: 60.8C Pos. 9: 66.1C
Pos. 2: 58.2C Pos. 6: 62.1C Pos:10: 67.2C
Pos. 3: 58.7C Pos. 7: 63.5C Pos.11: 68C
Pos. 4: 59.6C Pos. 8: 64.9C Pos.12: 68.5C
[/IMG]
تعليق