إعـــــــلان

تقليص
لا يوجد إعلان حتى الآن.

طريقه استخراج الكروموسومات من خلايا الدم !

تقليص
X
 
  • تصفية - فلترة
  • الوقت
  • عرض
إلغاء تحديد الكل
مشاركات جديدة

  • طريقه استخراج الكروموسومات من خلايا الدم !

    السلام عليكم ورحمه الله وبركاته ،،


    بحثت في مواقع كثيره عن طريقه استخراج الكروموسومات من خلايا الدم معمليا لكن للأسف ماحصلت شي ..

    إذا ممكن تعطوني الطريقه بالعربي أو بالانجلش أو إذا ممكن تعطوني الرابط اللي يشرح الطريقه


    ولكم مني دعوهـ عن ظهر قلب :sm188:

  • #2
    QIAamp® DNA Mini and Blood Mini Handbook


    http://www1.qiagen.com/HB/QIAampDNABloodMidiMaxiKit_EN


    http://www1.qiagen.com/HB/QIAampDNAM...loodMiniKit_EN

    تعليق


    • #3
      ألف شكر بستفيد منها كثييير ،،


      وماراح أنساكـ من دعواتي

      تعليق


      • #4
        الشكر الجزيل لكل من أفادنا دعواتي للجميع

        تعليق


        • #5
          شكرا انا استفد جدا من المنتدى الرائع

          تعليق


          • #6
            شكرا عن جد استفدت من الرابط
            تسلمي اختي
            http://up105.arabsh.com/my/169921d.gif

            تعليق


            • #7
              الشكر الجزيل للجميع
              وشكرا اختي الواقع والحياد
              الله يجزيكي الخير
              مهندسة جينات المستقبل:sm182:

              تعليق


              • #8
                يبدو ان هناك لبس لدي الاستاذة المشرفة الواقع والحياد
                فالسؤال عن استخراج الكروموسومات و ليس DNA
                والروابط خاصة بستخلاص ال DNA

                تعليق


                • #9
                  الفكرة مش بالتضحير
                  حيث ان التحضير عملية مخبرية عادية

                  الفكرة في عملية الكاريوتاب

                  وهذا يعني قراءة للكروموزمات والخروج بالتوصيات اللازمة

                  في حال الرغبة بالحصول على مزيد من المعلومات يمكنك الاتصال بي لمساعدتي في رفع مجموعة من الملفات والصور والأفلام الخاصة بالموضوع

                  مدونتي

                  تعليق


                  • #10
                    أختي.. انا فهمت إنك تريدين استخلاص ال DNA ككل حتى تحصلي على أكبر استفادة عليك استخدام kit لشركة معينة و اتباع تعليماته ..
                    الموضوع بسيط
                    مثلاً الأخت الواقع و الحياد وضعت رابط لشركة Qiagen .. ال kit الخاص باستخلاص الكروموسومات من الدم سهل الاستخدام و مردوده ممتاز اذا كان الدم بحالة جيدة اي اقصد انه تم استخدام في اقرب وقت بعد سحبه .. بصراحة kit ممتاز انصحك باستخدامه ..

                    ملاحظة هامة : هذا ال kit لاستخلاص ال DNA من الخلايا لاستخدامه في ال PCR مثلاً و ليس في ال karyotype ، الفرق انك في الحالة الاولى ستحصلي على ال DNA بشكل كامل بغض النظر عن حالته ( انتِ و حظك ) يعني كله فوق بعضه ، و ممكن يكون مكسر .. الخ بسبب تعرضه للعوامل كيميائية و فيزيائية اثناء استخلاصه تفرض عليه ان يكون بهذه الصورة ..

                    اما بالنسبة لل karyotype ، فنحن بحاجة الى كروموسومات منفصلة .. اي يجب تفجير الخلايا في مرحلة ال metaphase و معاملة الخلايا بطريقة مختلفة تماماً ..

                    اي طريقة استخلاص مختلفة من ناحية مواد و خطوات ، و الشروط الواجب توافرها في الخلايا مختلفة حيث في الحالة الاولى لا يهم في اي مرحلة من مراحل الانقسام تكون الخلايا ، اما في الثانية يجب ان تكون في ال metaphase لذلك نقوم بإيقاف نمو الخلايا في تلك المرحلة ... كل ذلك لأن الهدف من استخدام المادة الوراثية في الحالتين مختلف!!!

                    بالتوفيق
                    http://upload.smart-c.com/uploads/9851b4eabe.jpg

                    تعليق


                    • #11
                      Traditional Banding of Chromosomes for Cytogenetic Analysis

                      Traditional Banding of Chromosomes for Cytogenetic Analysis
                      Traditional banding of metaphase chromosomes allows identification of individual chromosomes and detection of gross chromosomal anomalies and abnormal chromosome structures. Giemsa (G) banding is the older and more familiar nonfluorescent technique that produces characteristic banding patterns. DAPI , a fluorescent DNA stain, produces banding patterns similar to those of G-banding and is much simpler to perform.

                      * Unit Introduction
                      * Basic Protocol: Giemsa Banding (G-Banding) of Metaphase Chromosomes
                      * Alternate Protocol: 4′-6-Diamidino-2-Phenylindole (DAPI) Staining of Metaphase Chromosomes
                      * Reagents and Solutions
                      * Commentary
                      * Literature Cited
                      * Figures
                      * Tables


                      Basic Protocol: Giemsa Banding (G-Banding) of Metaphase Chromosomes
                      Materials

                      * Metaphase slide preparation made 1 to 2 days before banding (unit 22.2)
                      * Trypsin working solution (see recipe)
                      * 1% (v/v) fetal bovine serum (FBS): mix 1 ml FBS with 99 ml H2O
                      * urr's buffer, pH 6.8: dissolve 1 Gurr's buffer table (Bio/medical Specialties) in 1 liter sterile H2O
                      *Giemsa stain working solution (see recipe)

                      * 55° to 60°C drying oven
                      * Forceps
                      * Coplin jars
                      * Phase-contrast microscope

                      Alternate Protocol: 4′-6-Diamidino-2-Phenylindole (DAPI) Staining of Metaphase Chromosomes

                      Materials:
                      * Metaphase slide preparation (unit 22.2)
                      * DAPI/antifade medium (see recipe)
                      * Glass coverslips
                      * Fluorescent microscope with DAPI filters




                      Images of G-banded metaphase spreads and karyotypes from human, mouse and rat tumors. For each panel, a G-banded metaphase spread and its karyotype has been shown for tumors derived from (A) human, (B) mouse, and (C) rat. All spreads show banding patterns that are well defined with few or no overlapping chromosomes.



                      DAPI staining of a prostate cell line subjected to a chemotherapeutic agent and 4 Gy radiation. Shown in panel A, labeled “i,” is a DAPI image of a prostate cell line subjected to mitomycin C treatment. Structural aberrations, e.g., radial structures, are labeled “ii.”. Also in panel A is the inverted DAPI image (labeled “iii”) demonstrating that DAPI banding provides similar banding patterns as G-banding, but at a lower resolution. Panel B illustrates the same prostate cell line subjected to 4 Gy of ionizing radiation, showing complex structural aberrations. Other aberrations, including DNA fragmentation, chromatid breaks, and dicentrics, can be identified. Arrows indicate multiradial chromosomal structures as shown enlarged in (ii).

                      Literature Cited:
                      Barch, M.J. 1991. The ACT Cytogenetics Laboratory Manual, 2nd Ed. Raven Press, New York.
                      Ellis, N.A., Proytcheva, M., Sanz, M.M., Ye, T.Z., and German, J. 1999. Transfection of BLM into cultured bloom syndrome cells reduces the sister-chromatid exchange rate toward normal. Am. J. Hum. Genet. 65:1368-1374.
                      Gebhart, E. 1981. Sister chromatid exchange (SCE) and structural chromosome aberration in mutagenicity testing. Hum. Genet. 58:235-254.
                      Mitelman, F. 1995. ISCN. 1995 An International System for Human Cytogenetic Nomenclature 1995. S. Karger, Basel, Switzerland.
                      Sumner, A.T., Evans, H.J., and Buckland, R.A. 1971. New technique for distinguishing between human chromosomes. Nat. New Biol. 7:232:31-32.

                      My Best regards Nehad R. Elsakany
                      مدونتي

                      تعليق


                      • #12
                        يعطيكم العافيه
                        إذا أردت أن تعيش سعيداً .. إنزع الحقد من قلبك

                        تعليق

                        يعمل...
                        X