بالنسبة لاستخدامي الشخصي للصبغه فانا استخدم صبغة ليشمان مع بودرة جمسا
علبة كاملة من صبغة ليشمان السائلة مع 3 جرام من بودرة جمسا واعملها MIX باستمرار واحفضها عندي لمدة اسبوع مع ملاحظة عمل MIX باستمرار
بعد اسبوع اسويلها فلترة وابدأ استخدامها
بحيث انها تكون على خطوات
الخطوة الاولى صبغة بدون اي اضافات لمدة 10 دقائق
الخطوة الثانية استخدمها 150 مل صبغه +350 مل ما مقطر او BUFFER Ph 6.8 لمدة 5 دقائق
الخطوة الثالثه ماء مقطر او buffr ph 6.8 لمدة خمس دقائق
الخطوة الرابعه غسيل خفيف وبعدها تنشيف
انا استخدم الطريقة وماشية معاي حلو بس استخدم ماء مقطر ومااستخدم buffer
1_ صبغه ماي جرونفلد
التحضير
1- يوزن 300 ملجرام من مسحوق الصبغه وتوضع في زجاجه سعه 200 الي مل 250مل
2- يضاف الى ذلك 100 مل من ميثيل الكحول النقي 96%
3- ترج الزحاحه وتخسن حتى درجه 50 م ثم تترك لتبرد حتى درجه حراره الغرفه
4- وترجي الزجاجه عدةرمرات لده يومين في درجه حراره الغرفه وتصبح جاهزه
2-صبغه جينر
تحضر نفس الطريقه ماي جرو نفلد فقط يضاف 100 مل من الميثانول النقي 500 ملجرام من مسحوق جينر
3- صبغة الجيمساء
1- نزن 1جرام من مسحوق الصبغه ويوضع في زجاجه
2- يضاف اليه 66مل جلسرين
3- يمزج ثم يسخن حتى درجه 56 م ولمده 120-90 دقيقه
4- يضاف 66 مل من ميثيل الكحول النقي
5- يمزج جيدآ ويترك المزيج لمده سبعه ابام في درجه حراره الغرفه
4-صغبه ليشمان
1- يوزن 200ملبجرام من مسحوق الصبغه وتوضع في زجاجه سعه 200-250مل
2- يضاف الى ذلك 100مل مثيل الكحول النقي
3- ترج الزجاجه ع فترات متقطعه وتسخن حتى 50 م لمدة 15 دقيقه وتترك تبرد وترشح وتصبح جاهزه
فـ عِندما وُلدت كنت
تبكي ..
والآخرون من حولك كانوا يبتسمون ..
فـ عِش حياتك جيدا ..!!لكي تكون أنت من يبتسم عندما تموت ..!
بينما الآخرون من حولك ..
يبكون ..!!
Principle:
Blood film enables us to evaluate WBC, RBC, and PLT morphology, also, allows us to perform differential WBC count, furthermore estimation of WBC and platelets counts can be done on blood films. Blood films are made on glass microscopic slides.
Sample:
Finger stick blood or EDTA anticoagulated venous whole blood may be used. Films of peripheral blood must be made immediately. Films may be made from EDTA anticoagulated blood as long as two to three hours after collection. All specimens should be free of clots.
Procedure:
1- Use clean standard size glass slides (3 inch x 1 inch = 7.5 cm x 2.5 cm), wiped from dust just immediately before use.
2- Place a small drop of well mixed anticoagulated whole blood, in the center line of the slide, about 1.5 to 2 cm from one end, with the aid of a capillary tube.
3- Immediately, without delay, with the aid of a second clean slide with uniform smooth edges (spreader slide), with a 30 –40 degrees angle, move back so blood drop will spread along the edge of the spreader slide, when this occurs, spread, or smear the film by a quick, unhazizating, uniform forward motion of the spreader.
Notes:
Before preparing the films, you must check that blood samples are free from clots, and this is done with two wooden applicator sticks. If clots are present the specimen is unsatisfactory.
Films can be labeled with patient’s name and /or Lab. No. on the thick end of the film itself, after being dried, by using a pencil.
With anemia (low Hct, reduced viscosity), the spreading angle should be greater, to avoid running off the slide.
With polycythemia (high Hct, increased viscosity),the spreading angle should be less, to avoid short, too thick films.
With large blood drops, increase the spreading angle.
With small blood drops, decrease the spreading angle.
If the anemia is too severe, let the blood specimen settle, so that blood is divided into two layers, plasma layer and red cell layer, then discard part of the plasma layer, then mix the blood specimen, by doing this you have increased the viscosity of blood, by this you will be able to prepare a nice blood film.
Romanovsky stains include:
Giemsa Stain
Wright’s Stain
Leishman Stain
May-Grünwald Stain
The widely and popular used Romanovsky stains are:
• Leishman Stain
• Wright’s Stain
Leishman Stain Procedure:
1- Let the films be air dried.
2- Put the films on a staining trough rack.
3- Flood the slides with the stain.
4- After 2 minutes ( or more, if the stain in newly prepared), add double volume of water, and blow to mix the stain with water, until a shiny layer is seen.
5- After 5-7 minutes, wash with a stream of water.
6- Wipe the back of the slides with gauze.
7- Set the films in upright position on a filter paper to dry .
8- Read the blood films microscopically.
تعليق