هلا أختي الهدف من هذه التجربة هو عزل الخمائر من اللحوم حسب قولك صح
طيب قبل ما اعطيك احتمالات الخطأ والحلول وكيفيه التحليل الصحيح الكثير الكثير ان شاء الله أيش عاوزة تثبتي بعزل الخميرة من اللحوم ؟؟؟

طيب ما جاوبتي علي استفساراتي راح اطلعك علي الاحتمالات للخطأ الذي وقعت فية من ناحية ومن ناحية أخري أختي حسب خبرتي في هذا المجال والحلول

انا ابي اعزل الــ yeast من اللحوم ( اي نوع من اللحوم سواء معلب او طازج(
اخذت 10 جرام من عينه لحم وحطيتها في 90 مل pepton water
ممتازة خطوة صحيحة
بعدين رجيتها كويس وخليتها تقريبا من2 الى 3 دقايق بعدين رجتها مره ثانيه ثم اخذت منها 1مل وحطيتها في انوبه تحتوي على 9 مل
pepton water وبديت اسوي التخفيفات الى الانبوبه السادسه يعني 10 اس سالب 6
تمام الي هذه الخطوة انتي صاح الصاح
المهم من الانبوبه السادسه اخذت نص مل وحطيت في الاطباق المحتويه على هذي الميديا
وهنا يكمن الخطأ أختي الفاضله التخفيف السادس ؟؟؟؟ !!!!!! ليش اخترتي السادس ؟؟؟ كان عليك التتدرج بعمل التخفيف الاول والثاني علي الأقل ومن ثم يمكنك ان تأخذي من التخفيف السادس اذا كان المطلوب مكن هو بالتحديد عدد الخمائر من هذا التخفيف فعمل التخفيف الاول والثاني راح يعطيك فكرة عن اذا ما كان هنالك خميرة اولا في هذه العينات ام لا فهمتي علي ؟
]SABOURAUD DEXTROSE AGAR
W/ CHLORAMPHENICOl
هذه الميديا جيدة لا بأس بها ويمكنك أختيار ميديا PDA فهي تقوم بفس المهام
بعد كذا حطيتها با الثلاجه اوفر نايت
سؤال مالذي جعلك تحطينها في الثلاجة هل لديك methods معينة تتبعينها ام هو اجتهاد منك فقط لا أظن هنالك خطوة مثل هذه يمكنك التحضين مباشرة في الحضان في درجة 25 -29 درجة
بعدين طلعتها تتحضن في درجه حراره الغرفه لمده 5 ايام
هذه صح بس للاسف ربما ادخالها الثلاجة قد يؤثر علي النتيجة اضافة الي ان اخترتي تخفيف بعيد جدا من المحتمل ان يكون عددها ضعيف لايتجاوز التخفيف الاول اوكي .
المهم الخلاصه بعد التحضين ماطلع لي اي شي ابدا ابدا ابدا
جربت مع عينه لحم اخرى غير اللي جربتها المره الاولى وبرضو ماطلع لي شي
جربت بعد في عينه لحم ثالثه برضو ماطلع شي
جربت ودخلتها الحضان درجة حرارته 29 درجه وماطلع لي شي

ابدا مو راضي يطلع شي انا با الضبط مو عارفه ايش هو الخطا الميديا ولا الطريقه ولا ايه والعينات جربت 7 انواع من مصادر لحوم مختلفه
ومو راضي يطلع لي شي ابدا

واضح أن الخطأ في الطريقة

اهلين اخوي مايكرو
انا ابي اعزل الخمائر من اللحوم بعدين اعرفها بس
يعني عزل بعدين تعريف

جميل فهمت عليك الحين راجعي الملاحظات اللي قلتها في الرد اعلاه وخلينا نتاقش مع بعض لايجاد حلول وشرح طريقه واضحة ومعتمدة في التحليل .....

اوك
* انا جربت ميديا الــ PDA مع الاكتك اسد بس برضو ماطلع لي شي
* ادخلها با الثلاجه لان الطبق عندي مصبوب من اول فاادخلها الثلاجه علشان لما احط النص مل تتشرب الميديا هذي النص مل

طيب المشكله الاولي انك بدأتي بالتخفيف السادس وهذا خطأ الصاح تتدرجي شوفي التخفيف الاول والبعده ثم البعدة
جربي لاتتدخلية الطبق الثلاجة هذه المرة وشوفي النتيجة

اوك انا عزلت اليوم وبدايه من التخفيف الاول الى التخفيف الخامس ولكل تخفيف سويت مكرر واحد
اليوم ماسويت تخفيف سادس
بس دخلتهم الثلاثه حوالي 4 ساعات وتو طلعتهم لما قلت لي ماادري ينفع ؟؟؟
وراح احضنهم في درجه حراراه الغرفه

اللحوم عموما المعلبة أختي نادرا ما تكون معالجة بمواد حافظة لذا لايظهر فيها الخمائر او حتي البكتريا الهوائية

ومع انو نحن في المختبر معظم اللحوم لانحلل لها الخمائر بنشوف السالمونيلا والايشريا كولاي والعد الكلي للبكتريا والكلستورديم بيرفنجس

ممتاز أحذفي موضوع الثلاجة هذه واعيدي التزريع

ممكن أعطيك فديو يساعدك في الشغل وتأخذي الفكرة العامة منه اوكي

طيب بجرب من غير ماادخلهم اثلاجه؟؟
بس فيه سوال عندي.. الحين الخمائر مو تحب درجه الحراره المرتفعه شوي.. الجو هالايام بارد شوي وانا راح احضنهم في الغرفه ما ادري هل درجه حراره الغرفه
مناسبه وراح يطلع لي في هاالدرجه نمو ؟؟؟؟؟

عندكم حضانة درجت حرارتها 25 مثلا او 29 درجة ادخليها فيها فهي اكثر ضمانا لان درجة الحرارة راح تكون منتظمة وثابته
اما عن درجة حرارة الغرفة ممكن طبعا بس لازم التحقق من درجة الحرارة بواسطة الثيرومتر االحراري ويمكن ان تنجح ولقد نجحت معي اكثر بس انا لا أضمنك ايش ممكن يحدث في الجو عندكم اثناء الخمس ايام التحضين وبعدين تأثير الضوء يمكن ان يلعب دور في النمو ....ز افضلك تكون في الحضانة هذه اضمن عشان بعدين ما تجي تقولي ياربي ايش السبب في عدم نمو الخميرة يكون من درجة حرارة الغرفة ....؟؟

أختي راح اضع لك رابط الطريقة او ال Method للتحليل الخمائر والفطريات في الاطعمة بصورة عامة ويمكنك جعله مرجعيك لك في حال كان هنالك احد يناقش مع من اين لك بهذه الطريق مثلا

وأخيرا أختي الفاضلة أذا لم ينمو لك الخمائر لا تستعجلي وتقولي ان هنالك مشكله في الميديا او الخطوات لانه بكل بساطة ان هذه اللحمة او العينة نظيفه وخالية من الخمائر او حتي اي بكتريا أخري

فهذه هي في حد ذاتها نتيجة قومي بتسجيلها


وشكرا

خلاص انا استى رابط الطريقه اللي راح تنزله

مشكوووووووور اخوي كثر نجوم السماء الله يفرج عنك كل ما اهمك ساعدتني الله يجزاك خير

راح اسوي زي ماقلت لي واذا صار شي جديد برجع اسالك :sm188:

خذت نص مل وحطيت في الاطباق المحتويه على هذي الميديا
SABOURAUD DEXTROSE AGAR

الصحيح ان تضعي 0.1 مل علي سطح الميديا ومن ثم بواسطة قضيب زجاجي معقم توزيعها ونشرها Spreading

وليس 0.5 مل