بامكانك الاطلاع على هذا
http://www.youtube.com/watch?v=_YgXcJ4n-kQ

خطوات الpcr في المختبر رجاءا

http://www.youtube.com/watch?v=sGP56...eature=related

يمكنك مراسلتى على الخاص اذا اردت ان تعرف mmzaher910@yahoo.com
والله الموفق

تختلف خطوات عمل الـ PCR باختلاف المواد بين الشركات واختلاف الجهاز المستخدم للكشف واختلاف المادة المراد كشفها .
ولكن هناك ثلاث خطوات أساسية :
الخطوة الأولى هي مرحلة استخلاص الحمض النووي المراد الكشف عنه من العينة وهي تشبه طريقة التجريد في عمل الكيمياء حيث تضيف مواد وتثفل ثم تهمل السائل الطافي وهكذا حتى آخر مرحلة حيث تحتفظ بخلاصة الحمض النووي المستخلص .
الخطوة الثانية تحضير محلول الكشف والمسمى Master mix والذي يحوي الأنزيم والذي هو أساس العمل وفعاليته هي التي تعطي الـ PCR فعاليته بالإضافة لوجود قطع من Primer - Probe
يتم وضع المحلول مع الحمض النووي المستخلص ضمن أنابيب خاصة بكل جهاز .
الخطوة الثالثة هي العمل على الجهاز :
حيث يقسم العمل إلى عدة مراحل وذلك حسب الكيت المستخدم ونحصل في النهاية على منحنيات للعينات ونتائج يجب معالجتها واتخاذ عدة إجراءات تبعاً للجهاز للوصول إلى النتائج النهائية .
وأهم شيء بالـ PCR هو عدم استخدام الهيبارين في العينات لأنه يثبط عمل الأنزيم
والشيء الآخر الدقة العالية في العمل لأننا نتعامل مع أحجام قليلة جداً في بعض المراحل قد تصل إلى 0.1 ميكرون في انفلونزا الخنازير
ومن البديهي أن تكون شروط العقامة والنظافة متوفرة عند إجراء مثل هذه التحاليل لحساسيتها الفائقة