مادام اقل من 1 فلا فرق بين 0.01 و 0.99
إعـــــــلان
تقليص
لا يوجد إعلان حتى الآن.
سؤال عن الأرقام في نتائج ELISA السلبية
تقليص
X
-
background noise
السلام عليكم : بالرغم من مشاركتى فى هذه الصفحة, الا أنى لم انتبه الى السؤال الاول الذى طرحه الاخ الكريم الاستاذ وليد نوح, وكان ذلك تقصيرا منى.
من اين تأتى هذه الارقام ؟ ان substrate المستخدمة لاظهار التفاعل فى الاليزا, هي مواد فعالة وتتحلل ببطء حتى فى غياب الانزيمات (يعنى حتى فى غياب الاجسام المضادة), وبالتالى يمكن ان تعطى قراءتها على الجهاز كثافة ضوئية تختلف عن الصفر, تعرف ب :
background noise اي ضجيج الخلفية او العمق, ويمكنك قراءة substrate على سبكترو, ستجد انها اعلى من الصفر, ولهذا عليك القيام بالكلبريشن كل فترة او عند كل كيت بسبب تغير background noise, واذا لم تفعل ذلك ستظهر لديك نتائج ايجابية كاذبة بسب ارتفاع قيمة background noise مع الزمن.
هل نستطيع ان نجعل قيمة background noise = صفر ؟
يمكن فى الكيمياء على السبكترو, لان التفاعلات شبه خطية, لذا نقوم بتصفير الجهاز بواسطة البلانك, فى الواقع ان ترى على شاشة السبكترو, ان البلانك لا يساوى صفر اي ان لديه background noise او absorbance غير معدوم, فنقوم بتصفير الجهاز ووضعه على الصفر لنقول له ان هذه القيمة صفر فى التركيز وصفر فى الابسوربانس, ثم ندخل الكلبريتر والعينة...
هل absorbance التى نجدها فى بلانك تجربة الجلوكوز, هي نسبة قليل من السكر ؟ ...لا,
ان تفاعلات الاليزا غير خطية وبالتالى غير مهيأة لتصفير background noise لان ذالك سيؤثر على منحنى الكلبريشن وبالتالى النتائج. وبالتالى ليس لنا الا تحمل تلك الارقم الصغيرة التى هي absorbance او background noise ل substrate او ضجيج الخلفية.وقل رب زدني علما
تعليق
تعليق