جمع ونقل العينات لزراعة الفيروسات
Collection of transport of specimens for virus culture
Collection of transport of specimens for virus culture
المبدأ :
مختبر تشخيص إصابات الفيروسات يحتاج إلى فهم النشوء المرضي (port hogenesis)للمسبب المتوقع ومعرفة مرحلة المرض والعمر للشخص المصاب أهم عامل هو اختبار العينة المناسبة وجمع العينة بطريقه حذره لضمان عزل نسبة النمو للكائن الحي الملوث (contaminated organism)
ملاحظه:viability
اختبار العينات :
الأفضل ربطه مع مرض معين تشخيصه ،العينة يجب أن تعكس حاله العضو المستهدف قدر الإمكان ،التي عادة تعتمد على الأعراض ألسريريه
المواد :
أ_Reagents:
الوسط الناقل للفيروس (viral transport media) يمنع جفاف العينة ويساعد على الحفاظ على فعالية لفيروس ويعيق نمو الكائن الحي الملوث ()هناك انواع مختلفة من VTM إما أنها مصنوعة خاصة (in house) أو صناعيا
VTM يتكون من بروتينات مثل Gelatin (Antimicor bi) مضاد للميكروبات في محلول ملحي (Buffered salt somtim) . انبوب VTM عادة يحتوي على2-3 مل من الوسط ،بعض الشركات توفره مع انابيب VTM ماسح جميع العينات
Leal proof
أنابيب VTM التي تحتوى على 5-7 مل من الوسط تستخدم لجمع ونقل عينات الأنسجة (Dilution Factor )
ب_ التجهيزات : supplies
1. حاويات ((containers معقمه و leat roof ، screw cap منها كأس البول Urine cups وأنابيب الطرد المركزي وأنابيب صغيرة مناسبة 1-2 مل من VTM لتحمل Hold
2. ماسحات قطن ، Dacron ،tipped ،rayon معقمه مع ماسحات بلاستيك أو ألمنيوم مرنة ذات رأس صغير نستخدم لبعض العينات من ماسحه (urethral swabs).
3. حقنة Tuberculin مع إبرة مقاس 26 أو 27 لسحب سائل (VESICULAR FLNID)
4. نستخدم انبيب جمع الدم المانعه للتجلط () التى تحتوي على Heparin
ج:المعدات : Equipment
الثلاجة (2-8ºم)
جمع العينة .A تجمع العينات بأسرع ما يمكن بعد ظهور الأعراض .
أحسن وقت لسحب العينات خلال 3 أيام من ظهور الاعراض ويقل بعد 5ايام مع كثير من الفيروسات .
تجمع عينة تشريحية للجثة بعد الموت بأسرع ما يمكن .
ب: أشير في جدول لجمع العينات مزرعة الفيروسات. عموما يوضع الماسح في أنبوب يحتوي على كمية قليله من
VTM والقش طر Scrapi وقطع صغيره من الأنسجة إلى أنبوب يحتوي على كمية صغيرة من VTM او محلول ملحي (Saline) .ضع السائل ومعظم العينات ( الانسجه ) إلى حاوية معقمه مانعه للتسرب (leak proof)
،أضف كمية من VTM كافية لمنع جفاف الأنسجة .
ج:اجمع العينات في حاله لتعقيم جيد قدر الإمكان
د:ضع كل العينة في حاوية مختلفة عليها اسم المريض ورقم الملف ومكان أخد العينة وتاريخ العينة ووقت أخد العينة
هـ:احصل على تاريخ كامل عن المريض يحتوي على وقت ظهور الإعراض ، الفحص ألسريري ،تاريخ التعرض الأخير ،نوع الناقل للمرض الذي تعرض له ،متى سافر الى ألمنطقه الموبؤه، أخر لقاح.
نقل العينـــــــــــات:. Specimen transport
أ-ضع العينة في حاوية محكمة الإغلاق وورقة طلب معملي (request) الى كيس بلاستيكي مخصص لنقل العينات .
ب- توصل العينات إلى المختبر بأسرع ما يمكن بعد جمع العينات ،حتى لا تفقد قابلية الإصابة (infectivity) مع الوقت ،العينة تحتوي على فيروسات ضعيفة في تخفيف معين كل ذالك نفقد الفيروسات قابلية الإصابة مع تأخير نقل العينة .
إذا لم يكمن توصيل العينة بأسرع وقت ممكن .
توضع في الثلاجة (2-8ºم) أو توضع في ثلج رطب او كيس بارد.
فقدان قابلية الإصابة للفيروسات بطئ في درجة حرارة الثلاجة. لا تجمد العينة .
ج- إما بالنسبة لمزارع فيروسات الجهاز التنفسي تنقل على الفور الى التلقيح في مزرعة الخلايا .
Cytomegalovirus و Vericellazoster أيضا هي ضعيفة نسبيا والعينات ممكن إن تفقد قابلية الاصابه سريعا
د-لا تجمد العينات قبل اختبارها Cytomegelavine وبعض فيروسات الجهاز النفسي سريعا تفقد نشاطها مع التجمد والذوبان .
حفظها في درجة حرارة -20ºم غير مرض وناجح
أحفظها في درجة حرارة- 4ºم أو-70ºم.
ممكن تحسين حياة الفيروسات الضعيفة باستخدام VTMمثل M4 أو HBSS مع Gelatin.
تعليق